La coupe Gambardella 2000-2001
est la 47e édition de l'épreuve organisée par la Fédération française de football et ses ligues régionales. La compétition est ouverte aux équipes de football de jeunes dans la catégorie des 18 ans. La compétition comprend une première phase régionale suivi d'une phase nationale comportant huit tours.
Le vainqueur de l'édition 2000-2001, l'AJ Auxerre est sorti de la coupe Gambardella au stade des quarts de finale. La finale est remportée par le FC Metz face au Stade Malherbe Caen.